测序方法主要有以下几种:
Sanger双脱氧链终止法:这是由Frederick Sanger发明的最常用的测序方法。它基于在DNA聚合酶反应中加入双脱氧核苷酸,从而终止DNA链的延长。通过使用四种不同的双脱氧核苷酸,可以分别对DNA链进行终止,然后对每个终止的DNA片段进行测序。
Maxam-Gilbert化学降解法:这种方法是由Maxam和Gilbert于1977年开发的。它通过化学手段对DNA的特定序列进行降解,然后对降解产物进行测序。
焦磷酸测序技术:这种方法是第四代测序技术,基于焦磷酸键的释放与DNA聚合酶活性相关,通过高分辨率的成像系统检测焦磷酸的释放,从而确定DNA序列。
纳米孔单分子测序:这是最新的测序技术,通过纳米孔捕捉单个DNA分子,同时测出其碱基序列。这种方法具有超高的通量,一次能测序数百万个DNA分子。